然而，在实际操作中，当分子内同时存在多个反应位点时，如分子内既存在高反应活性的伯胺/醇等，又有低活性的受阻胺/苯胺，如何让后者被精准酰化，而前者“按兵不动”，通常需要繁琐的保护与脱保护步骤，这不仅效率低下，而且原子经济性差。

近期，默克公司的研究团队开发了一种新的通用合成策略，在无保护基的情况下，利用TCFH-Oxyma组合进行低活性胺的选择性酰化。一方面，TCFH-Oxyma组合可以实现选择性的N-酰化，即醇存在下可以实现低活性胺高选择性酰化。另一方面，采用瞬态亚胺保护策略，通过引入缺电子芳醛与活泼伯胺原位形成亚胺，再通过TCFH-Oxyma组合进行低活性胺的酰化。这两套方案系统解决了低活性胺选择性偶联难题。

研究发现，TCFH与不同亲核添加剂（如NMI, DMAP, Oxyma）组合时，其N-选择性与O-选择性截然不同（见图1）。其中，TCFH与催化量Oxyma的组合在胺与醇的竞争中表现出卓越的N-选择性，能够高效、高选择性地实现低活性胺与羧酸在醇存在下的酰胺偶联。如，对于缺电子的苯胺，产物比例高达13:1；对于位阻大的α-甲基脯氨酸衍生物，选择性更是超过50:1，几乎专一性地生成了目标酰胺。

图1 不同缩合试剂及组合的选择性

这种独特的化学选择性源于特定的反应机理：Oxyma作为亲核催化剂，与TCFH活化的羧酸形成高活性的酰基-Oxyma中间体，该中间体对胺具有极高的选择性。

团队进一步以1-丙醇作为竞争性亲核试剂，探索了低活性胺的底物范围（图2）。结果表明，苯胺系列化合物选择性随苯胺富电子程度增加而升高，多种2,6-取代的空间位阻苯胺均能良好反应。 此外，空间位阻伯胺、仲胺（包括带有仲胺的氨基酸）以及受阻的α-叔胺也展现出优异的化学选择性。

图2 TCFH-Oxyma高效介导N-选择性偶联反应

当原料中同时存在活泼和低活性氨基时，研究团队采用了瞬态亚胺保护策略（图3）：向反应体系中加入一种缺电子芳醛（如2-溴-4-氯苯甲醛）。由于伯胺的亲核性更强，会优先与醛快速结合形成亚胺，从而被暂时屏蔽，无法参与后续偶联。与此同时，低活性氨基则能顺利与羧酸偶联。反应结束后，只需简单的酸性后处理，亚胺即可水解，重新释放出伯胺。

该策略适用范围广泛，无论是电子性质各异的苯胺（从富电子到缺电子），还是空间位阻大的α-叔胺、氨基酸衍生的仲胺，都能在竞争性亲核试剂存在下，以优异的产率和选择性得到目标酰胺，且手性中心保持完好。

图3 瞬时亚胺保护策略适用范围

该方法可直接应用于复杂药物分子和生物活性分子的后期修饰。如，在治疗多发性硬化症的药物芬戈莫德的衍生物上，在无保护基的情况下，该方法成功实现了单一酰胺化，选择性高达23:1，避免了多步保护操作的麻烦。对于含有多个胺基的肽段（如二肽Pro-Lys），该方法也能精准地只与反应性较低的脯氨酸残基偶联，选择性极佳。

图4 复杂底物选择性酰胺偶联

上述工作开发了一种通用策略，系统解决了酰胺偶联中在无保护基的情况下两种选择性难题。其一，TCFH-Oxyma组合能够高选择性的介导氨基发生偶联反应，而羟基不受影响；其二，亚胺瞬态保护策略通过可逆的亚胺形成，实现单一低活性胺的精准偶联。该合成策略避免了额外的保护-脱保护步骤，简化了合成路线。

此外，所用试剂（TCFH-Oxyma）成本低，安全性高、对复杂分子兼容性好，且能保持手性中心完整性，在药物研发和复杂分子合成中具有重要的实用价值。

参考文献：

[1] General chemoselective hindered amide coupling enabled by TCFH-catalytic Oxyma and transient imine protection. DOI：10.1039/d4cc05313c.